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一、无菌室的使用
1、无菌室应保持清洁整齐,室内仅存放必须的实验用具如酒精灯、酒精棉、打火机、
镊子、接种针、接种环、记号笔等。不要放与检测无关的物品。
2、用75%酒精擦拭工作台、门、窗、桌、椅及地面,然后用75%酒精喷雾消毒空气,zui
后臭氧杀菌1小时。
3、定期检查室内空气无菌状况,细菌数应控制在10个以下,发现不符合要求时,应立
即彻底消毒灭菌。
4、无菌室杀菌前,应将所有物品置于操作之部位(待检物例外),然后打开紫外灯杀
菌30分钟,时间一到,关闭紫外灯待用。
5、进入无菌室前,必须于缓冲间更换工作服、工作鞋。
6、操作应严格按照无菌操作规定进行,操作中少说话不喧哗,以保持环境的无菌状态。
7、火焰灭菌: 接种针、接种环等可直接火焰灭菌。
8、一 般消毒:无菌室内的凳、工作台、试管架、天平、待检物容器或包装均无法进行
灭菌,必须用其他方法进行消毒处理,采用75%酒精擦拭消毒,工作人员的手也用此法
进行消毒。
二、无菌室的准备工作及要求
1、实验用的有关器材, 搬入无菌室前必须分别进行灭菌消毒。
2、操作人员必须将手清洗消毒,穿戴好白大褂和鞋,才能进入无菌室。
4、进入无菌室后再一次消毒手部,戴上口罩然后才进行实验操作。
三、无菌室操作过程注意事项
1、玻璃器皿也应轻取轻放,以免破损污染环境。
2、操作应在近火焰区进行,以免染菌。
3、接种环、接种针等金属器材使用前后均需灼烧,灼烧时先通过内焰,使残物烘干后再
灼烧灭菌。
4、使用吸管时,切勿用嘴直接吸、吹吸管,而必须用洗耳球操作。
5、观察平板时不好开盖,如欲沾取菌落检查时,必需靠近火焰区操作,平皿盖也不能大
开,而是上下盖适当开缝。
6、工作结束,收拾好工作台上的样品及器材,不要的废品带出无菌室,zui后用消毒液擦
拭工作台。
四、无菌室管理规定
1、无菌室地面、台面、其它表面每3日擦拭1次。操作台每日用75%酒精擦拭消毒,每
次使用前准备好物品紫外灭菌30分钟后方可使用。
2、从室外带入无菌室内的所有物品表面要用75%酒精或紫外照射预先消毒。无菌操作前
75%酒精消毒手掌、手背。整个操作严格执行无菌操作。
3、无菌室内定期消毒灭菌:无菌室内地面拖干净并喷雾消毒。每三天一次。
4、无菌室内无菌状况定期检测:灭菌后的接种室内桌上和桌下各放一套培养基平皿,
暴露15分钟,盖上,37℃培养24小时,每个平皿的菌落≤4,则认为效果良好,否则
需延长照射时间或加强其它措施。半个月一次。
5、灭菌后物品放在位置,注明灭菌日期,高压灭菌物品可存放7-14天,过期不能
再用,需重新包装灭菌。
五、无菌室菌种管理规定
1、车间用的菌种按编码严格划分做好标识区别摆放,与技术部的实验菌种分冰箱摆放。
2、车间用菌种每日传代一次,并做好传代记录。
2、车间用的菌种一个月活化一次,严格做好标识。
3、车间用菌种每种菌种一年做两次甘油管冷冻保藏。
4、车间菌种每半年做一次菌种筛选,保持菌种的纯正。
六、无菌室外来人员管理规定
1、外来人员进入无菌室必须申请,得到公司领导批准方可进入,进入后必须有专人陪
同,并填写出入记录。
2、除本部门以外人员必须穿戴好白大褂、更换鞋,才能进入无菌室。
3、无菌室内无人做实验,必须保持门锁闭,其他人进入必须与无菌室保管人员申请。
4、除本部门以外人员在无菌室操作,必须严格执行无菌室各项管理制度,否则接受成
长赞助每项5元。
七、无菌室蒸汽灭菌锅安全使用
1、注意用电安全,锅内水位要在标准水位以上方可通电使用。
2、锅内带灭菌物品不得超过灭菌锅容积的2/3。
3、灭菌过程中工作人员不得长时间离开,如果因工作需要室内有班组其他工作人员,要予以提醒,并做好看护,以防烫伤。
4、灭菌完毕后要缓慢放气,必须在压力表的指针回到“0”以后,放气阀完全打开,待
锅内蒸气放尽后,方可开盖。
5、灭菌锅的压力表按时送检。
无菌室的设计和建设应符合符合GB 50364和GB 19489 的相关要求。
无菌室大小应能够满足检验工作的需求。内墙为浅色,墙面和地面应光滑,墙壁与地面、天花板连接处应呈凹弧形无缝隙,无死角,易于清洁和消毒。
无菌室入口处应设置缓冲间,缓冲间内应安装非手动式开关的洗手盆,并可有毛巾。缓冲间应有足够的面积以保证操作人员更换工作服及鞋帽。
无菌室内工作台的高度约80cm,工作台应保持水平,工作台面应无渗漏耐腐蚀易于清洁、消毒。
无菌室内光照应分布均匀,工作台面的光照度应不低于540lx。
无菌室应具备适当的通风和温度调节的条件。无菌室的推荐温度为20 ? 相对湿度为40-60%。
缓冲间及操作室内均应设置能达到空气消毒效果的紫外灯或其他适宜的消毒装置。
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